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科普:关于结核病的实验室诊断

©原创 2019-02-25 14:44

结核病是一种由结核分枝杆菌感染导致的慢性疾病,可经呼吸道传播,传染性极高,是全球第二大传染病死亡的主要原因。结核病细菌学检测是结核病控制、流行病学调查以及鉴别诊断的“金标准”,特别是耐药结核病的确诊、治疗方案的选择、疗效考核、防治效果评价等方面的可靠指标。

目前市三院针对结核分枝杆菌的常规细菌学检测方法是金胺O抗酸染色直接涂片法,该检测方法简便,但检出率低,只能检测抗酸杆菌,不能区分是结核分枝杆菌还是非结核分枝杆菌。对于痰涂片阳性的标本需要进一步进行结核菌培养、菌型鉴定和药敏试验。

结核菌培养及传统药敏试验:将预处理的标本通过固体培养基在一定温度下培养并鉴定出菌型及耐药情况,由于抗酸杆菌生长缓慢,培养一般需要6-8周,药敏需要4周,方法虽简便但传统的药敏试验采用表型分析的方法,过程耗时,在没有获得药敏试验结果的情况下,患者只能以标准的一线抗结核药物治疗,耐药患者得不到及时诊断和合理治疗。

虽然结核病细菌学检查是结核病诊断的“金标准”,然而涂片阳性率低、培养耗时长,不能完全满足临床需求,尤其是菌阴肺结核、肺外结核和儿童结核的诊断十分困难,而免疫学检查标本来源方便、简便快速、灵敏特异,目前已成为结核病重要的辅助检查手段。结核病细胞免疫学诊断包括:结核菌素皮肤实验和γ-干扰素释放试验。其中γ-干扰素释放试验不受卡介苗接种和大多数环境分枝杆菌的影响,对活动性肺结核、肺外结核、HIV合并结核、免疫功能低下合并结核及儿童结核病的诊断都有所帮助。

早期快速的诊断是合理治疗耐多药结核病的基础,也是耐药结核病防治的关键。随着分子生物学技术的突飞猛进, 耐药结核病相关耐药基因快速诊断技术的使用日益广泛。目前三院采用的GeneXpert MTB/RIF检测就是一种全新的快速诊断结核病和检测结核分枝杆菌耐药性的系统, 该系统针对结核分枝杆菌的81bp利福平耐药核心区间设定引物、探针并进行扩增检测, 根据其是否发生基因突变来检测样本中是否含有结核分枝杆菌及其是否对利福平耐药, 可以全自动地对样本进行核酸提取、纯化及浓缩,在2小时内出结果。该方法快速简便,并可鉴定菌型,为临床医生提供有效可靠的诊断依据。(潘锋 杨泠)

责任编辑:崔骏  郑海仑

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结核病是一种由结核分枝杆菌感染导致的慢性疾病,可经呼吸道传播,传染性极高,是全球第二大传染病死亡的主要原因。结核病细菌学检测是结核病控制、流行病学调查以及鉴别诊断的“金标准”,特别是耐药结核病的确诊、治疗方案的选择、疗效考核、防治效果评价等方面的可靠指标。

目前市三院针对结核分枝杆菌的常规细菌学检测方法是金胺O抗酸染色直接涂片法,该检测方法简便,但检出率低,只能检测抗酸杆菌,不能区分是结核分枝杆菌还是非结核分枝杆菌。对于痰涂片阳性的标本需要进一步进行结核菌培养、菌型鉴定和药敏试验。

结核菌培养及传统药敏试验:将预处理的标本通过固体培养基在一定温度下培养并鉴定出菌型及耐药情况,由于抗酸杆菌生长缓慢,培养一般需要6-8周,药敏需要4周,方法虽简便但传统的药敏试验采用表型分析的方法,过程耗时,在没有获得药敏试验结果的情况下,患者只能以标准的一线抗结核药物治疗,耐药患者得不到及时诊断和合理治疗。

虽然结核病细菌学检查是结核病诊断的“金标准”,然而涂片阳性率低、培养耗时长,不能完全满足临床需求,尤其是菌阴肺结核、肺外结核和儿童结核的诊断十分困难,而免疫学检查标本来源方便、简便快速、灵敏特异,目前已成为结核病重要的辅助检查手段。结核病细胞免疫学诊断包括:结核菌素皮肤实验和γ-干扰素释放试验。其中γ-干扰素释放试验不受卡介苗接种和大多数环境分枝杆菌的影响,对活动性肺结核、肺外结核、HIV合并结核、免疫功能低下合并结核及儿童结核病的诊断都有所帮助。

早期快速的诊断是合理治疗耐多药结核病的基础,也是耐药结核病防治的关键。随着分子生物学技术的突飞猛进, 耐药结核病相关耐药基因快速诊断技术的使用日益广泛。目前三院采用的GeneXpert MTB/RIF检测就是一种全新的快速诊断结核病和检测结核分枝杆菌耐药性的系统, 该系统针对结核分枝杆菌的81bp利福平耐药核心区间设定引物、探针并进行扩增检测, 根据其是否发生基因突变来检测样本中是否含有结核分枝杆菌及其是否对利福平耐药, 可以全自动地对样本进行核酸提取、纯化及浓缩,在2小时内出结果。该方法快速简便,并可鉴定菌型,为临床医生提供有效可靠的诊断依据。(潘锋 杨泠)

责任编辑:崔骏  郑海仑

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